申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過濾,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,歡迎咨詢上海曼博生物。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑質(zhì)量好?申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!?全球PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝幫助用戶更好地了解PEI轉(zhuǎn)染試劑的操作流程分子量為25000的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑即Polysciences23966轉(zhuǎn)染效率比較高.
1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,歡迎咨詢上海曼博生物。?如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!
1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化。?如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!?哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價比較高?
PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學家選擇PEIMAX,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來,經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強。PEIMAX是一種非GMP等級PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)科學研究及藥物研發(fā)早期階段。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(PEI)衍生物。由PEIMAX配置而成的即用型無菌試劑,采用0.1μmPES無菌過濾器,完全消除支原體污染風險。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無縫過渡到MAXgene用于cGMP生產(chǎn)。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!轉(zhuǎn)染效率好的PEI轉(zhuǎn)染試劑是哪個品牌?天津高實用性PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝
MAXgene GMP是一種cGMP級PEI轉(zhuǎn)染試劑。申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
接種細胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,總體積如表1所示,每個孔置入的細胞量應能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉(zhuǎn)染3h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。孵育細胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達。請自行確定檢測時間。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!近期還可申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝!申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
本文來自吉林省科維光電有限公司:http://www.surw.com.cn/Article/50d13199818.html
常州百年歷史保險箱
我們?yōu)槟峁└鞣N防盜等級的產(chǎn)品,保險箱按照不同的“等級”進行測試,測試等級越,保險箱的安全級別也越。我們模擬竊賊使用的各種工具進行防盜測試,這其中包括熱熔工具,氧氣電弧切割等工具。根據(jù)需要保存的物品重 。
線邊庫立庫技術(shù)是一種重要的物流倉儲技術(shù),它的技術(shù)含量和應用價值正在被越來越多的行業(yè)和領(lǐng)域認可。線邊庫立庫技術(shù)是指在物品存放時,通過利用高架式貨架和堆垛機等設(shè)備,將貨物存儲在貨架的側(cè)面,以實現(xiàn)自動化、高 。
骨灰盒的幾個風水禁忌:給逝者下葬之前,要聘請專業(yè)的風水先生,在墳墓地選址方面要確定位置,這樣選擇安葬的地點之,再進行將逝者的骨灰和進行下葬,才能讓逝者得到安息,人的運勢也會更,逝者在死亡之的12個小時 。
長春市綠園區(qū)幸福護理院是經(jīng)區(qū)民政局批準設(shè)置的民辦非營利性養(yǎng)老服務機構(gòu),始建于1997年8月,建筑面積1400平方米,經(jīng)過幾年的悉心經(jīng)營,護理院從原來的30張床位發(fā)展到現(xiàn)有的123張床位,設(shè)自理區(qū)、半自 。
鍍鋅鋼管:為提高鋼管的耐腐蝕性能,對一般鋼管黑管)進行鍍鋅。鍍鋅鋼管分熱鍍鋅和電鍍鋅兩種,熱鍍鋅鍍鋅層厚,電鍍鋅成本低。吹氧焊管:用作煉鋼吹氧用管,一般用小口徑的焊接鋼管,規(guī)格由3/8寸-2寸八種。用 。
固定體育場四個拐角立柱A、膨脹螺絲固定用電鉆在水泥地面打眼,打眼深度不低于10cm。膨脹螺絲直徑不低于12mm。先把膨脹螺絲固定好,立柱坐上膨脹螺絲,然后用螺絲栓擰緊。B、水鉆打眼固定用帶架的水鉆放平 。
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龍灣湖畔在售價格:8000元/㎡,裝修狀況:毛坯,項目位置:休寧縣五城率水河畔,南鄰率水河新安江上游),北側(cè)為自然山體。龍灣湖畔樓層狀況:小區(qū)規(guī)劃58幢低層徽派別墅)1~16#;一幢高層;45幢單層或 。
智能加藥模塊是通過在線監(jiān)測水質(zhì)參數(shù),根據(jù)預設(shè)的算法自動調(diào)整藥劑投加量來實現(xiàn)自動調(diào)整的。具體來說,智能加藥模塊通過傳感器實時監(jiān)測水質(zhì)指標,如pH值、濁度、電導率等,并將這些數(shù)據(jù)傳輸給控制系統(tǒng)??刂葡到y(tǒng)根 。
瑞典色彩藝術(shù)漆區(qū)別于同行業(yè)的主要不同之處在于,它打破了傳統(tǒng)代理制模式。在面對經(jīng)濟低迷、信息高度發(fā)達以及人們消費習慣從線下轉(zhuǎn)為線上的現(xiàn)狀下,該品牌選擇與時俱進,對經(jīng)營模式進行創(chuàng)新。首先,蘇州御品天承家居 。
由于Amass連接器種類繁多,結(jié)構(gòu)各不同,不少新客戶在選擇Amass連接器的時候,很擔心混淆公母頭,需要與銷售人員反復溝通確認。Amass帶您詳細了解下LC系列連接器的公母!01連接器的公母頭相對來說 。